纯氟油Fluo-Oil 135(氟油（yóu）3M Novec HFE7500电子氟化液的替（tì）代品)

Fluo-Oil 135（简称FO135） 是（shì）一种纯氟化（huà）油（yóu），可用于替换氟油3M Novec HFE7500电子氟化液。 Fluo-Oil 135氟油的（de）化学和物理（lǐ）化学性（xìng）质与（yǔ）3M Novec HFE7500 相似（sì），如下（xià）表（biǎo）所示:

优势（shì）

生物相容（róng）性、可重复性和稳定性。

如何使用？

氟油Fluo-Oil 135用于稀释FluoSurf Neat表面活性剂（jì）或已经用Fluo-Oil 135油稀释的表（biǎo）面活性剂（jì）。

（由于FluoSurf Neat表面活性剂是一种PFPE-PEG结构的复杂高（gāo）效纯（chún）表面活（huó）性（xìng）剂（jì），因（yīn）为（wéi）类似于（yú）PFPE-PEG结构的纯表面活性剂如FluoSurf Neat，Surf-Drop，PFPE-PEG-PFPE两（liǎng）嵌（qiàn）段或三嵌段表面（miàn）活性剂，Surf 含氟表面活性剂（jì）等，基本上都可以使用纯氟油（yóu）Fluo-Oil 135进（jìn）行稀释。稀释的（de）浓度从0.2%到12%之（zhī）间。）

保存

室温下避（bì）光保存

安（ān）全注意事（shì）项

● 避免（miǎn）吸（xī）入、摄入和接触皮肤和眼（yǎn）睛

● 穿戴耐化学腐蚀（shí）的个人防护装备（bèi）

● 戴上（shàng）合适的手套

● 穿合适（shì）的防护服

● 戴侧护罩的安全眼镜

与3M HFE7500油产生（shēng）液滴性能的测试比较

分别用（yòng）3M HFE7500和（hé）Fluo-Oil 135氟化油稀（xī）释FluoSurf neat表面（miàn）活性剂，得到4w/w%的质量浓度。

水滴产生或油包水液滴产生的（de）两相流速（sù）：

油相流速为300μL/hr，水相流（liú）速为100μL/hr。

水相为PBS溶液或100μM荧光（guāng）素的PBS溶液（用于测试液滴的（de）泄露）

倒置显微（wēi）镜观察和（hé）Image J软件（jiàn）分析。

一（yī）、液滴尺（chǐ）寸及（jí）其分布（bù）

在（zài）Fluo-Oil 135和（hé）HFE7500油中，产生相似尺寸的水滴（dī）。在既定流速参数下，液滴的平均直径为（wéi）110μm。液滴（dī）尺寸的CV分别为2.3%（Fluo-Oil 135油（yóu））和2.9%（HFE7500油）。

二（èr）、液滴稳定性

大多数研究团队使用液滴微流体（tǐ）进行细胞封装或 PCR 应用。 因此，需要通过 PCR 的（de）加热循环（huán）以及（jí）在 37°C 下长期孵育来产生稳定的液滴。 表面活性（xìng）剂的选择至关重要，但选择油同样（yàng）重要，以确（què）保可重复（fù）的实（shí）验以及单分散液滴群的生成和保存。

分别从三个方面测试液（yè）滴的稳定（dìng）性：一是把液滴重新注入（rù）到（dào）玻璃观察腔室内；二是经（jīng）典的PCR热（rè）循环过程，循环过程30次，每次热循环为98°C运行10s, 50°C运行5s, 72°C运（yùn）行10s；三是置于（yú）37℃的培养箱内放（fàng）置3天。对1万个（gè）液滴进行分析。

无论是在 Novec™ HFE 7500 还是 Fluo-Oil™ 135 中形成 FluoSurf™ 稳定的液滴，在 PCR 加热循（xún）环后或在（zài） 37°C 孵育 3 天后，液滴（dī）平均尺寸在生（shēng）成时保持（chí）不变 [约 110μm (0.7nL)] 。此外，液滴种群仍然是单分散的。 根据统（tǒng）计分析，计算出在加热（rè）循（xún）环后，只有 5% 的整体液滴（dī）的大（dà）小与平均初始液滴直径的差异超过 10%。

将（jiāng）氟化油从 Novec™ HFE 7500 切换到（dào） Fluo-Oil™ 135 对液（yè）滴稳定性（xìng）没有影（yǐng）响。

三、液滴内的分子滞留

基（jī）于液滴的化（huà）学或生化（huà）分析依（yī）赖（lài）于试（shì）剂在单个液滴中保（bǎo）持隔离。 泄（xiè）漏到连续（xù）相和液滴之间的交换，即（jí）使很（hěn）低，也会（huì）影响结果的（de）完整性（xìng），因此，分子保留是选（xuǎn）择（zé）氟化（huà）油时（shí）要考虑的重要参数。 众（zhòng）所（suǒ）周知（zhī），氟化油会限制液（yè）滴之间的（de）分子（zǐ）交换，因此应验证（zhèng）切换油的影响。

同时生成两种油包水乳液[“空”（负载 PBS）和“满”（负载荧（yíng）光素）液滴]，一（yī）次使（shǐ）用 Novec™ HFE7500，然后使用（yòng） Fluo-Oil™ 135 作（zuò）为（wéi）连续相（xiàng）。 两种混合物，每一种都包含两个种群，在 37°C 下（xià）孵育（yù），并在不同的时间点（diǎn）拍摄照片。 使用（yòng） ImageJ 软件（jiàn）对液滴（dī）内荧光强度的（de）演变（biàn）进行了统计定量分析。

上图显示了两个群体之间平均荧（yíng）光强度（dù）差异的演变（染料加（jiā）载和空液滴）以及在初始（shǐ）时间（jiān）点和 48 小时（shí）后相关的荧光和明（míng）场图（tú）片（piàn）。

在 24 小时的过程中，两种氟化油（yóu）产生的液滴中荧光素（sù）的泄漏率相似（约 15% 泄（xiè）漏），并且（qiě）在 Fluo-Oil™ 135 中产（chǎn）生液滴（dī）的情况下保持（chí）恒定 3 天。相反（fǎn），在 24 小时后（hòu）， Novec™ HFE7500 中液滴的泄（xiè）漏继续减（jiǎn）少并达到（dào） 30% 左右。 这种较长孵育时间（jiān）的（de）较差（chà）保（bǎo）留性能可归因于后一（yī）种油的粘（zhān）度（dù）略低，加速（sù）了液滴之间更快的（de）分子交换。

结论

对（duì）于基于液滴（dī）的（de）微流体（tǐ）应用，从一种氟化（huà）油类型切换到另一种类型可能（néng）会对微流体（tǐ）实验的过程产生重大影响，尤（yóu）其（qí）是（shì）对液滴的有效生成产（chǎn）生重（chóng）大影响（xiǎng）。 在氟油3M Novec™ HFE7500电子（zǐ）氟化液 和 氟油（yóu）Fluo-Oil™ 135 的情况下，已（yǐ）证实更换（huàn）这两种氟化油对实验条（tiáo）件（jiàn）和结果没有影响。 当使用 Fluo-Oil™ 135 作为连（lián）续相（xiàng）时，甚（shèn）至可以观（guān）察到荧光素在液滴（dī）内（nèi）的更好保留。

氟化（huà）油Fluo-Oil™ 135 是用于液（yè）滴微流体应用的3M Novec™ HFE7500 氟油 的有效替代品（pǐn）。